免疫组化实验中,组织取材及固定这么做才是正确的!
发布时间:2025-05-21
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作者:东极药物
免疫组化实验难做吗?当然不是,它实验流程和方法并不难。但是为什么很多人会在做免疫组化实验的时候经常出现失败呢?其实追根究底,就是我们平时在做免疫组化实验过程中有一些实验操作细节没注意,发生问题尤其多的···
免疫组化实验难做吗?当然不是,它实验流程和方法并不难。但是为什么很多人会在做免疫组化实验的时候经常出现失败呢?其实追根究底,就是我们平时在做免疫组化实验过程中有一些实验操作细节没注意,发生问题尤其多的就是大家在进行组织取材固定的时候!那免疫组化实验中,组织取材及固定怎么做才是正确的呢?
不急,首先,我们先了解下免疫组化实验中,我们为什么要进行组织固定?
1、固定,能更好地保持组织、细胞的结构和形态,防止离体组织自溶和细菌繁殖导致的组织腐败,一旦组织自溶或者腐败,实验就无法进行下去了;
2、固定,可以更好地保持定位细胞内特殊的成分,就比如细胞内的一些蛋白质成分,蛋白质在经过固定后,可沉淀或凝固定位在细胞内的原有部位;
3、固定可使组织细胞中各种成分沉淀凝固并易着色,不同物质产生不同的折光率,便于区别不同组织成分;
4、还有就是,固定后的组织硬度是大大增加了的,这样对于后续我们进行切片操作也会更为方便。
其次,就给大家说说免疫组化实验中,组织取材固定有哪些操作是格外要注意的!
免疫组化实验中,病理取材需要注意以下几方面:
1、组织块的厚度建议不要太厚,一般的话 2-5mm会更好一些,因为太厚了组织容易固定不到位,造成实验数据偏差;
2、切取组织的时候,要使用更为锋利的刀片,尽量快尽量轻,不要挤压组织,以免引起组织结构的变形(这也是为什么建议要用锋利的刀具切取组织的原因,太钝的刀具是很容易挤压组织、破坏组织原有结构的);
3、取材前,组织块的血液、粪便等杂物,是需要用生理盐水冲洗干净的,这个过程中也要注意不要挤压组织。
免疫组化实验中,组织固定需要注意以下几方面:
1、组织离体后,固定工作需要在5min之内完成,不然容易造成实验数据偏差;
2、注意固定液的浓度必须准确,过稀或过浓都会影响组织的形态和固定效果;
3、固定过程中一定要避免组织相互挤压,尤其容器上要选择较大一些的;
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